Potvrzení identity hmotnostní spektrometrií

Čistota vám řekne, jaký podíl vzorku tvoří zamýšlená látka. Neřekne však, o kterou látku jde. Potvrzení identity odpovídá na druhou otázku: je to skutečně molekula, kterou uvádí etiketa?

Co potvrzení identity dokládá

Používáme hmotnostní spektrometrii, která vzorek ionizuje a měří poměr hmotnosti k náboji (m/z) vzniklých iontů. Peptidy se obvykle ionizují jako vícenásobně nabité částice, molekulová hmotnost se proto rekonstruuje z hodnot m/z napříč pozorovanými nábojovými stavy. Naměřená hmotnost se pak porovná s hodnotou vypočtenou z uvedené sekvence. Shoda v rámci tolerance metody deklarovanou identitu podporuje, neshoda upozorňuje na jinou látku, modifikaci nebo záměnu. V protokolu uvádíme deklarovanou látku, očekávanou hmotnost a naměřenou hmotnost vedle sebe.

Proč identita patří k čistotě

Chromatografický výsledek čistoty může ukázat jediný čistý pík a přesto popisovat nesprávnou látku. Čistota měří podíl, nikoli identitu. Dva peptidy s podobným chováním mohou eluovat v obdobných časech, vysoké procento čistoty samo o sobě tedy nedokazuje, že jde o zamýšlenou molekulu. Provedeny společně, identita potvrdí, o kterou látku jde, a čistota, jaký podíl vzorku tvoří.

Testování domluvíte přes zaslání vzorku.